La preparación de muestras para el análisis SEM (microscopía electrónica de barrido) implica varios pasos fundamentales para garantizar que la muestra se conserva correctamente y está lista para la obtención de imágenes detalladas.
7 pasos esenciales a seguir
1. Fijación primaria con aldehídos
Este paso consiste en fijar las proteínas de la muestra utilizando aldehídos. Los aldehídos ayudan a preservar la estructura de las proteínas y evitan su degradación.
2. 2. Fijación secundaria con tetróxido de osmio
Tras la fijación primaria, la muestra se somete a una fijación secundaria con tetróxido de osmio. Este paso ayuda a fijar los lípidos de la muestra y proporciona contraste para la obtención de imágenes.
3. Serie de deshidratación con disolvente
A continuación, la muestra se deshidrata utilizando una serie de disolventes como etanol o acetona. La deshidratación elimina el agua de la muestra y la prepara para el secado.
4. Secado
Una vez deshidratada la muestra, es necesario secarla. Para ello se pueden utilizar varios métodos, como el secado en punto crítico, la liofilización o simplemente el secado al aire. El objetivo es eliminar todo rastro de disolvente de la muestra.
5. Montaje en un soporte
A continuación, la muestra seca se monta en un soporte, que es un pequeño cilindro o disco metálico. El soporte proporciona una plataforma estable para la muestra durante la obtención de imágenes.
6. 6. Recubrimiento por pulverización catódica con material conductor
Para evitar la carga y mejorar la conductividad, la muestra se recubre con una fina capa de material conductor, como oro o carbono, mediante un recubrimiento por pulverización catódica. Este recubrimiento asegura que el haz de electrones pueda interactuar adecuadamente con la muestra durante el análisis SEM.
7. Consulte las directrices del fabricante del instrumento
Es importante tener en cuenta que las técnicas específicas de preparación de muestras pueden variar en función de la naturaleza de la muestra y de los requisitos específicos del análisis SEM. Por lo tanto, es esencial consultar las directrices y protocolos del fabricante del instrumento para la preparación de la muestra.
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