Para preparar las muestras para el análisis SEM, se pueden seguir los siguientes pasos:
1. 1. Fijación primaria con aldehídos: Este paso consiste en fijar las proteínas de la muestra utilizando aldehídos. Los aldehídos ayudan a preservar la estructura de las proteínas y evitan su degradación.
2. 2. Fijación secundaria con tetróxido de osmio: Tras la fijación primaria, la muestra se somete a una fijación secundaria con tetróxido de osmio. Este paso ayuda a fijar los lípidos de la muestra y proporciona contraste para la obtención de imágenes.
3. 3. Serie de deshidratación con disolvente: A continuación se deshidrata la muestra utilizando una serie de disolventes como etanol o acetona. La deshidratación elimina el agua de la muestra y la prepara para el secado.
4. 4. Secado: Una vez deshidratada la muestra, es necesario secarla. Para ello se pueden utilizar varios métodos, como el secado en punto crítico, la liofilización o simplemente el secado al aire. El objetivo es eliminar todo rastro de disolvente de la muestra.
5. Montaje en un soporte: A continuación, la muestra seca se monta en un soporte, que es un pequeño cilindro o disco metálico. El soporte proporciona una plataforma estable para la muestra durante la obtención de imágenes.
6. 6. Recubrimiento por pulverización catódica con material conductor: Para evitar la carga y mejorar la conductividad, la muestra se recubre con una fina capa de material conductor, como oro o carbono, mediante un recubrimiento por pulverización catódica. Este recubrimiento garantiza que el haz de electrones pueda interactuar correctamente con la muestra durante el análisis SEM.
Es importante señalar que las técnicas específicas de preparación de muestras pueden variar en función de la naturaleza de la muestra y de los requisitos específicos del análisis SEM. Por lo tanto, es esencial consultar las directrices y protocolos del fabricante del instrumento para la preparación de la muestra.
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