Cuando se utiliza un rotovap, la temperatura ideal suele oscilar en torno a los 50°C.
Esta temperatura es especialmente importante cuando se utiliza un vacío profundo.
El ajuste de 50 °C garantiza una evaporación eficaz sin dañar la muestra.
Esto es especialmente importante cuando se trata de componentes delicados como péptidos o proteínas.
Por qué 50 °C es el ajuste de temperatura óptimo
La elección de 50 °C equilibra la necesidad de calor suficiente para facilitar la evaporación.
También evita el sobrecalentamiento de materiales sensibles.
Bajo un vacío profundo, el punto de ebullición de los disolventes se reduce significativamente.
Esto permite que se evaporen a temperaturas más bajas que a presión atmosférica normal.
Esto es especialmente importante cuando la muestra incluye moléculas biológicas delicadas.
Estas moléculas pueden desnaturalizarse o degradarse a temperaturas más altas.
El papel del vacío en el funcionamiento del Rotovap
El vacío profundo es esencial para reducir el punto de ebullición de los disolventes.
Esto permite el funcionamiento a temperaturas más bajas.
Las fuentes de vacío tradicionales, como las bombas peristálticas o los aspiradores, son insuficientes.
No pueden alcanzar las bajas presiones (en el rango de mTorr) necesarias para un funcionamiento eficaz del rotovap.
Por lo tanto, se recomienda una bomba de vacío robusta capaz de alcanzar estas bajas presiones.
Guía paso a paso para el funcionamiento de un rotovap
1. Puesta en marcha de la bomba de vacío
En primer lugar, ponga en marcha la bomba de vacío y déjela funcionar durante unos minutos antes de inyectar la muestra.
Esta configuración inicial del vacío garantiza que el sistema está listo para funcionar.
2. 2. Cebar el Rotovap
Una vez que el vacío sea estable y muestre una lectura baja, inyecte un pequeño volumen (20% del total) del líquido en la válvula del rotovap.
El proceso de evaporación comienza a medida que la temperatura del enfriador aumenta ligeramente.
3. Ajuste la inyección
Vigile la temperatura; una vez que se estabilice o empiece a bajar, abra lentamente la válvula de inyección para introducir más líquido en el matraz rotativo.
El objetivo es igualar las tasas de entrada y salida para mantener un proceso estable.
Conclusión: La combinación perfecta para una eliminación eficaz del disolvente
El funcionamiento de un rotovap a unos 50 °C bajo un vacío profundo es un enfoque práctico.
Esta combinación garantiza tanto la velocidad como la seguridad del proceso de evaporación.
Evita daños en muestras delicadas.
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